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【标题】冈田酸所致微管相关蛋白tau Ser396位点过度磷酸化抑制细胞凋亡
【摘要】目的 探讨磷酸酯酶活性降低致tau过度磷酸化与细胞凋亡的关系.方法 稳定表达人tau edna的鼠成神经瘤细胞(n2a/tau)分3组.对照组不处理;十字孢碱(staurosporine,stp,凋亡诱导剂)处理6 h为stp组;用磷酸酯酶pp-2a的抑制剂冈田酸(okadaic acid,oa)处理4 h,再用stp处理6 h为oa+stp组.流式细胞仪检测凋亡率,免疫印迹检测ser396位点磷酸化tau(ser396 p-tau)和总tau的表达,免疫荧光双标检测ser396 p-tau的阳性产物与活化的半胱氨酸蛋白酶(cleaved caspase-3)阳性产物的共定位关系.结果 ①凋亡率:对照组为(4.37±1.47)%,stp组为(19.84±3.25)%,oa+stp组为(12.12±2.46)%;②免疫印迹:oa+stp组ser396 p-tau的表达明显高于另两组,总tau表达组间无差异;③免疫荧光双标:进一步印证免疫印迹结果,且3组均显示活化的caspase-3和ser396 p-tau阳性产物大多不共定位于相同细胞.结论 pp-2a活性降低所致tau ser396位... (04-13 21:17)
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